تقنية كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (High-Performance Liquid Chromatography – HPLC) هي واحدة من أكثر التقنيات استخدامًا في التحليل الكيميائي لفصل، تحديد، وقياس المكونات في خليط ما. تعتمد HPLC على تمرير محلول يحتوي على العينة عبر عمود يحتوي على مادة ثابتة (stationary phase)، مع تدفق سائل آخر (mobile phase) يعمل على فصل المكونات المختلفة بناءً على تفاعلاتها مع المادة الثابتة. إليك كل ما تحتاج معرفته عن هذه التقنية المهمة.
مكونات نظام HPLC
- خزان السائل المتحرك (Mobile Phase Reservoir):
- يحتوي على السائل المتحرك (المذيب) الذي يحمل العينة عبر العمود. يتم اختيار السائل المتحرك بناءً على طبيعة العينة والمادة الثابتة.
- مضخة (Pump):
- مسؤولة عن دفع السائل المتحرك عبر النظام عند ضغط عالٍ. المضخة في HPLC قادرة على توليد ضغوط تصل إلى عدة آلاف من الباسكال لضمان تدفق السائل المتحرك بثبات.
- المحقن (Injector):
- يتم إدخال العينة في النظام باستخدام المحقن. يمكن أن يكون المحقن يدويًا أو أوتوماتيكيًا، حيث يتم إدخال كمية صغيرة من العينة في تدفق السائل المتحرك.
- العمود (Column):
- العمود هو قلب نظام HPLC ويحتوي على المادة الثابتة التي يتم فيها فصل مكونات العينة. يُصنع العمود من مواد مثل السيلكا المعدلة، ويأتي بأطوال وأقطار مختلفة بناءً على التحليل المطلوب.
- الكاشف (Detector):
- يقوم الكاشف بتحديد المكونات المفصولة عند خروجها من العمود. يمكن أن يكون الكاشف حساسًا لامتصاص الأشعة فوق البنفسجية (UV) أو الضوء المرئي، كما توجد أنواع أخرى مثل كاشف الطيف الكتلي.
- مسجل البيانات (Data Recorder):
- يقوم بتسجيل استجابة الكاشف على شكل كروماتوغرام، وهو رسم بياني يعرض الزمن مقابل شدة الإشارة. يساعد في تحليل وتفسير النتائج.
كيف تعمل تقنية HPLC؟
- إدخال العينة:
- تبدأ العملية بإدخال العينة في تدفق السائل المتحرك، حيث يتم حمل العينة إلى العمود.
- فصل المكونات:
- عندما تمر العينة عبر العمود، تتفاعل مكوناتها بشكل مختلف مع المادة الثابتة بناءً على خصائصها الكيميائية مثل الحجم، القطبية، والشحنة. هذا يؤدي إلى فصل المكونات.
- الكشف والتحليل:
- بعد الفصل، تصل المكونات المفصولة إلى الكاشف، الذي يحدد متى يخرج كل مكون من العمود ويولد إشارة استجابة.
- تحليل البيانات:
- يتم تسجيل إشارات الكاشف على شكل كروماتوغرام، حيث يظهر كل مكون في العينة كقمة (peak) في الرسم البياني. يمكن تحليل الكروماتوغرام لتحديد تركيز المكونات المختلفة في العينة.
كانت هذه أهم المعلومات حول مكونات جهاز ال HPLC للمزيد من المعلومات حول ذلك أو ل حلول المختبرات في الرياض لا تتردد بالتواصل مع شركة الخليج العلمي للحلول المخبرية في السعودية.
